Nach der Trennung von ihrem Freund Joker sucht die ehemalige Psycho-Therapeutin Harley Quinn in Gotham City nach einer neuen Aufgabe. Die findet sie in der Superheldinnen-Truppe "Birds of Prey", bestehend aus Huntress, Black Canary und Renee Montoya, die gerne in Sachen Selbstjustiz unterwegs sind. Gemeinsam machen sie Jagd auf den narzisstischen Bösewicht Roman Sionis aka Black Mask und seine rechte Hand Zsasz, die die junge Cass bedrohen.